脑血管病转化医学北京市重点实验室包括中心实验室(2410平方米)、脑血管病研究中心、检验中心、影像中心、及随访与数据中心等部门,已建立临床大规模数据研究、基因组学、蛋白组学、细胞培养、组织病理及动物实验等多项科研技术相关实验设备及技术平台。下设7个工作室,包括样本库、分子生物学室、蛋白质室、细胞室、组织学室、显微镜室、流式高内涵室,可为院内外科研项目及相关教学工作提供评估、咨询和实验服务,并可开展特殊检测项目,如流式分选、内皮细胞培养、干细胞培养、动脉粥样硬化组织样本检测等。

随着天坛医院迁址新院,对实验室硬件投入进一步加强,引入了大型设备如流式分选仪、激光共聚焦显微镜、斑马鱼模式动物平台、活细胞工作站、超高分辨液相色谱质谱联用仪等。实验室现有包括样本保存设备、样本解析设备、实验基础设备、动物临床前评价设备及临床检验设备110余种,总投入2.23亿元人民币。随着科研服务任务的开展,按照PDCA(Plan-Do-Check-Action)原则,实验室已建立实验室管理体系和各项规章制度,各仪器有专人负责维护,实验室正常运转,以满足本院目前在应用基础和基础研究方面需求。

1组织学平台

可开展组织学常规实验,如石蜡包埋、石蜡切片、冰冻切片、震动切片等;可开展免疫荧光染色、免疫组化染色、HE染色、Fast Blue染色、Mallory染色、原位杂交等染色工作;可通过免疫组化方法实现对膜蛋白及胞内、外蛋白的定性、定位检测及相应的定量分析,并可应研究需求对2种及以上(最多5种)的蛋白实现共定位检测;可通过原位杂交方法实现对microRNA等分子的定性、定位检测。

平台负责人:曹敬丽

2分子生物学平台

可开展基因克隆、载体构建、核酸提取、Real-time PCR、蛋白纯化等常规基因、Western、蛋白水平实验。近三年拟开展基因芯片数据分析、SNP检测、Crispr-Cas9基因编辑等实验项目。

平台负责人:李昊文

3细胞生物学平台

培养的细胞类型为多种原代肿瘤细胞、原代免疫细胞、原代皮细胞、肿瘤干细胞、造血干、祖细胞、神经干细胞等;细胞的功能考察从体外实验扩展到体内功能评价。

平台负责人:贺文艳

4显微成像平台

已配备正置显微镜、倒置显微镜、体视显微镜、激光切割显微镜、共聚焦显微镜。通过正、倒置显微镜,可对组织切片、培养细胞等实现普通光和荧光的观察及拍照;通过体式显微镜,可实现动物在体实验精密操作;通过激光切割显微镜,可实现对特定部位激光切割,进一步培养或进行分子学相关检测;通过共聚焦显微镜,可对组织切片或细胞爬片的荧光免疫组化结果或特定荧光信号进行共聚焦拍照定性、定位、定量分析,可同时拍摄多个通道及进行3D扫描和3D成像。

平台负责人:郭安臣、付金生

5流式细胞检测和分选平台

实验室配备的流式细胞仪可对细胞进行3激光9色荧光信号分析;同时还可以对目标细胞群体进行无菌分选。可分选人胶质瘤干细胞、内皮细胞、小鼠外周及中枢免疫细胞等。

平台负责人:董成亚

6小动物平台

拥有模式生物斑马鱼饲养系统、小动物手术显微镜、神经功能评价用水迷宫系统等。大型仪器包括膜片钳、显微注射系统、小动物活体成像。膜片钳,可记录脑组织切片电信号沿神经环路的传递,将为研究中枢神经系统突触传递以及学习记忆的变化等提供可靠的技术支持。显微注射系统,主要应用于卵子和早期胚胎注射,胚胎干细胞(ES)和诱导性多能干细胞(IPS)移植,体细胞核移植,用原核注射和胞浆注射(如CRISPR-Cas,TALEN)获得转基因动物等。小动物活体成像系统包含了生物发光以及荧光成像模式的2D和3D重构功能,可动态监测细胞动态变化,用于疾病分子机制探究和新药研发等。

平台负责人:董雯

7脂代谢与动脉粥样硬化中心

依托科研项目保存临床珍贵样本。目前有-80℃冰箱21台、-150℃冰箱2台、液氮罐13个,实物样本50000余例,涉及样本种类为全血、血清、血浆、DNA、RNA、组织、尿液、细胞等,样本库建设配有恒温空调、双向供电、门禁、信息化管理。可进行血浆分离、血清分离以及单个核细胞 ( 白细胞 ) 分离,血清、血浆、脑脊液、组织等样本保存和样本初级数据库构建。

平台负责人:赵耀波

8蛋白平台

蛋白平台具有多功能酶标仪(迪肯:spark)、洗板机、多模式微孔板成像检测仪、纳米颗粒分析仪、超声细胞粉碎机、垂直电泳仪、蛋白转膜/染色系统、双色红外荧光成像仪、化学发光凝胶成像仪、蛋白类样本系统、超速离心机(Beckman)等大型仪器设备,可开展常规的细胞破碎、蛋白提取、蛋白纯化、免疫印迹反应、免疫共沉淀实验、酶连免疫反应、外泌体检测等实验。

平台负责人:范俊婉

9样本库

依托科研项目保存临床珍贵样本。目前有-80℃冰箱21台、-150℃冰箱2台、液氮罐13个,实物样本50000余例,涉及样本种类为全血、血清、血浆、DNA、RNA、组织、尿液、细胞等,样本库建设配有恒温空调、双向供电、门禁、信息化管理。可进行血浆分离、血清分离以及单个核细胞 ( 白细胞 ) 分离,血清、血浆、脑脊液、组织等样本保存和样本初级数据库构建。

10活细胞工作站

高内涵图像分析仪可在保持活细胞结构和功能完整性的前提下,同时检测不同条件对细胞形态、生长、分化、迁移、凋亡、代谢途径及信号转导等方面的影响。

11生物信息学分析

可展开高通量测序、分型、表达数据的存储、计算、分析和解读,目前已配置服务器、芯片工作站等设备,包括全基因组关联分析、差异表达基因挑选在内的多项分析流程正在逐步优化。新采购的超高分辨液相色谱质谱联用仪。